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直擴系列一:寶銳生物PCR直擴試劑,讓分子診斷更簡單快速!

2021-11-01 10:25:43

前言

直接PCR(Direct PCR)是一種不經核酸提取而直接對生物樣本進行擴增的反應,是目前分子診斷領域的熱門技術之一。與常規PCR的主要區別在于,樣本可不經過核酸抽提,直接進行PCR反應,因此對于參與直接PCR反應的酶的耐受性和buffer的兼容性有較高的要求


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傳統的PCR反應需要以高質量的核酸為模板進行反應,如模板中有樣本抑制物或提取試劑組分殘留時就會抑制PCR反應的順利進行。而寶銳生物推出的用于PCR直擴的核酸檢測試劑含有創新型的獨特配方,可對生物樣本進行原位裂解、擴增,并保證結果的準確性。此技術大大降低了勞動強度,節約了人力成本和實驗資源,提高了檢測效率。



免提取 可凍干

全過程無加熱、無核酸提取純化。樣本可直接作為模板上樣進行qPCR檢測,即混即用;可提供常規型/可凍干型/防污染體系配方,規格支持個性化定制。


更穩定 靈敏度高

HBV血漿/血清樣本最低檢測限為30IU/mL。


廣泛適用 兼容性強

DNA/RNA均可進行直擴檢測,兼容市面上常規熒光定量PCR儀器及快速熒光定量PCR儀


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貨號:MD2091

SensiDirect Premix-UNG (Probe qPCR)

SensiDirect Premix Buffer(dUTP)         50×SensiDirect Enzyme/UNG Mix


測試報告

測試一

1.  DNA直擴試劑(MD2091)進行HBV、內標基因雙重檢測;

2.  分別對比測試純化模板、血漿模板和血清模板。

 

1. 實驗方法

HBV純化模板的加量為10μL/T(25μL反應體系),血漿模板和血清模板的加量為6.25μL/T(25μL反應體系)。

 

擴增程序

SLAN-96P:50℃ 2min;95℃ 5min;50 Cycles(95℃ 10s,55℃ 40s)。


2. 實驗結果

 擴增曲線

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Ct值統計

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結果分析

1.  HBV血漿和HBV血清樣本擴增效果相當。

2.  從Ct值上看,HBV純模板擴增較HBV血漿或血清模板提前,但由每孔的當量模板量來計算,HBV純模板擴增效率與HBV血漿或血清模板相當。



測試二

DNA直擴試劑(MD2091)測試HBV血漿模板的線性范圍,評價試劑擴增效率。

 

1. 實驗方法

HBV血漿模板設置:1.6×10?IU/mL,2T;1.6×10?IU/mL,2T;1.6×10?IU/mL,2T;1.6×10?IU/mL,2T;1.6×103IU/mL,2T;

加樣量:6.25μL/T(25μL體系)。

 

擴增程序

SLAN-96P:50℃ 2min;95℃ 5min;50 Cycles(95℃ 10s,55℃ 40s)。

 

2. 實驗結果

擴增曲線

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Fam通道標準曲線:

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Ct值統計

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結果分析

標準曲線相關系數-0.99967,相關性良好,結果可靠。試劑擴增效率99.045%,表示HBV血漿各濃度梯度的復孔重復性好、不同濃度的模板擴增效率較為一致,實驗結果穩定可靠、可重復性好。


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本系列未完待續,下期更精彩!

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